La Iglesia de San Carlo Borromeo, se encuentra dentro del complejo del Conservatorio de San Carlo, una antigua institución de Pienza, construida en el siglo XVII y ampliada en los siglos siguientes.
La iglesia, con su sobria fachada y su sugestivo interior, alberga una obra de arte de extraordinaria importancia: el retablo de Francesco Rustici, también conocido como "il Rustichino", que representa a la Virgen con el Niño con los santos Carlo Borromeo, Francesco, Chiara, Caterina de Siena y Giovanni Battista.
Rustici, poco conocido por el gran público, fue un pintor de gran talento cuya carrera se truncó prematuramente, dejando al mundo del arte un catálogo limitado pero de notable calidad. Murió a los treinta años y se lo considera uno de los principales exponentes del naturalismo de Caravaggio en Siena.
El cuadro, fechable en los años 1622-1623, representa una "Santa Conversación", con la figura central del Niño Jesús bendiciendo al devoto San Carlo Borromeo, bajo la dulce mirada de la Madre.
La Iglesia de San Carlo Borromeo reabrió sus puertas al público en diciembre de 2024 después de haber sido restaurada, devolviéndole su esplendor original a uno de los lugares de culto más fascinantes de Pienza.